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產(chǎn)品展示
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kinesin-5抑制劑(EMD534085)
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產(chǎn)品報(bào)價(jià):
產(chǎn)品特點(diǎn):
kinesin-5抑制劑(EMD534085)公司正在出售的產(chǎn)品:NCOA2 類固醇受體激活蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1mlDonkey Anti-human IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的驢抗人IgG 規(guī)格: 0.1mlMouse Anti-human IgG/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的小鼠抗人IgG 規(guī)格: 0.1mlGREB1 雌激素調(diào)控蛋白GREB1抗體 規(guī)格: 0.1m
  kinesin-5抑制劑(EMD534085)的詳細(xì)資料:

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1) 準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

二. 細(xì)胞處理:

1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

中文名稱:kinesin-5抑制劑(EMD534085)

英文名稱:EMD534085

產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg

產(chǎn)品貨號(hào):BJ-01X8509

EMD534085是有效選擇性的有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白-5(kinesin-5)的抑制劑,IC50值為8nM。

注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

:858668-07-2

純度:98.61%

分子量:476.53

儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。


QQ截圖20220509112004.png

細(xì)胞培養(yǎng)方法:

1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

大鼠 CD83 基因全長(zhǎng)ORF克隆SiRNA大量SperfusinX脂質(zhì)體細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒  10次

大鼠 CD82 基因全長(zhǎng)ORF克隆SiRNA大量SperfusinX脂質(zhì)體靜脈法動(dòng)物轉(zhuǎn)染試劑盒  10次

大鼠 CD81 基因全長(zhǎng)ORF克隆SiRNA大量SperfusinX脂質(zhì)體腹腔法動(dòng)物轉(zhuǎn)染試劑盒  5次

大鼠 IL7 基因全長(zhǎng)ORF克隆SiRNA大量SperfusinX脂質(zhì)體局灶法動(dòng)物轉(zhuǎn)染試劑盒  5次

大鼠 IFNGR1 基因全長(zhǎng)ORF克隆動(dòng)物細(xì)胞β-半乳糖苷活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒  20次

大鼠 PVRL2 基因全長(zhǎng)ORF克隆β-半乳糖苷標(biāo)準(zhǔn)曲線化學(xué)發(fā)光法測(cè)定試劑盒  20次

大鼠 CD79B 基因全長(zhǎng)ORF克隆動(dòng)物組織β-半乳糖苷活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒  20次

大鼠 CD99 基因全長(zhǎng)ORF克隆細(xì)胞β-半乳糖苷原位染色試劑盒  100次

大鼠 PROM1 基因全長(zhǎng)ORF克隆全組織β-半乳糖苷原位染色試劑盒  10次

大鼠 CSF2RB 基因全長(zhǎng)ORF克隆冰凍切片β-半乳糖苷原位染色試劑盒  50次

大鼠 LIFR 基因全長(zhǎng)ORF克隆通用型組織/細(xì)胞β-半乳糖苷原位染色試劑盒  10/100次

kinesin-5抑制劑(EMD534085)

 


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