測(cè)定步驟: 1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。 2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。 3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制) 4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。 5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑) 特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。 產(chǎn)品名稱 | 磷脂酶A2測(cè)試盒100管/48樣 | 規(guī)格 | 100管/48樣 | 檢測(cè)方法 | 微量法 | 貨號(hào) | BJ-01S9848 |
商品介紹: 測(cè)定意義: 磷脂酶A2(EC3.1.1.4)是磷脂sn-2位脂?;饷?,廣泛存在于動(dòng)植物組織、細(xì)菌、細(xì)胞核分泌物中,參與脂肪消化,精子成熟、細(xì)胞信號(hào)傳遞、脂質(zhì)過氧化修復(fù)、宿主反應(yīng)等生理過程,在控制體內(nèi)磷脂類物質(zhì)平衡、調(diào)節(jié)機(jī)體新陳代謝、參與疾病的病理進(jìn)程等方面發(fā)揮著及其重要的作用。 測(cè)定原理 磷脂酶A2作用于2-硫代十六酰乙基磷酸(HEPC)產(chǎn)生游離巰基,與DTNB反應(yīng)生成黃色物質(zhì),在412nm處有特征吸收峰。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器 天平、超速冷凍離心機(jī)、研缽、可見分光光度計(jì)、微量石英比色皿。 |
選擇抗凝的注意點(diǎn): ①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致; ②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固; ③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿); ④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。 操作步驟: 實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。 Middle East Respiratory Syndrome-Coronavirus(MERS-CoV)中東呼吸綜合征RT-LAMP試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周 Streptococcus equi subspecies equi馬鏈球馬亞種LAMP試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周 Enterovirus(EV)腸道病毒B組探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周 Fusarium oxysporum尖孢鐮刀探針法熒光定量PCR試劑盒(植物病原) 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周 Radix scutellariae黃芩PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周 Herba epimedii淫羊藿染料法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周 Semen astragali complanati沙苑子探針法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周 小鼠源性成分PCR檢測(cè)試劑盒 種源性檢測(cè)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周 Flos chrysanthemi菊花PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周 Rhizoma polygoni cuspidati虎杖PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周 蝦源性成分PCR檢測(cè)試劑盒 種源性檢測(cè)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周 Lumpy Skin Disease Virus(LSDV)疙瘩皮膚病病毒PCR試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用) 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周 磷脂酶A2測(cè)試盒100管/48樣麥芽糖(腦膜炎奈瑟氏菌專用) 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:20ml/支 冰凍切片半胱蛋白-4(CASPASE-4)活性原位熒光染色檢測(cè)試劑盒 50次 冰凍切片組織衰老晚期特異性脂褐素堿性品紅(ZIEHL-NEELSEN)原位染色試劑盒 50次 細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)(DNA抑制)試劑盒 20次 血液鎂離子(Mg)濃度反應(yīng)光譜法定量檢測(cè)試劑盒 20次 3%NaCl精雙水解 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:20支 全組織免疫熒光顯微鏡*間接檢測(cè)試劑盒(含一抗和熒光二抗) 10次 石蠟切片組織衰老特異性早期脂褐素蘇丹黑原位直接染色試劑盒 50次 組織鈣離子濃度比色法定量檢測(cè)試劑盒 20次 PBS-Tween20洗液 英文名稱:PBS-Tween20 lotion 產(chǎn)品規(guī)格:250g 冰凍切片組織NF KAPPA B P50蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒 10/20次 |