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產(chǎn)品展示
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丙酮酸脫氫酶測試盒50管/48樣
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丙酮酸脫氫酶測試盒50管/48樣公司正在出售的產(chǎn)品:78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human ATP-binding cassette sub-family B member 5 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Norrin 0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human T-cell surface glycop
  丙酮酸脫氫酶測試盒50管/48樣的詳細資料:

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱:丙酮酸脫氫酶測試盒50管/48樣

檢測方法:可見分光光度法

產(chǎn)品分類:三羧酸循環(huán)系列

產(chǎn)品規(guī)格: 50管/48樣

檢測方法:可見分光光度法

產(chǎn)品貨號:BJ-01S9767

商品介紹:

測定意義:

PDH(EC 4.1.1.1)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,是丙酮酸脫氫酶復(fù)合體(PDHC)催化丙酮酸氧化脫羧的限速酶,催化丙酮酸脫梭生成-TPP,把糖酵解和三羧酸循環(huán)連接起來。

測定原理

PDH催化丙酮酸脫氫,同時還原WST-8產(chǎn)生黃色物質(zhì),從而導致450nm光吸收的增加。

可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

圖片1.png 

所需的儀器和用品:

可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗

樣本和試劑浪費!

1、樣本制備

組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進行提取

 

細菌/細胞樣本:

先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數(shù)量(10

4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。
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注意事項:

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?

對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時間不夠,可以延長反應(yīng)時間(反應(yīng)時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通??梢允箿y定正常。計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 丙酮酸脫氫酶 測試盒 50管/48樣
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