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產(chǎn)品展示
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ATP檸檬酸裂解酶測試盒100管/96樣
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產(chǎn)品型號:
產(chǎn)品報(bào)價(jià):
產(chǎn)品特點(diǎn):
ATP檸檬酸裂解酶測試盒100管/96樣公司正在出售的產(chǎn)品:0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Sterol regulatory element-binding protein 2 0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Gamma-glutamyltranspeptidase 1 0.312-20 ng/mL ELISA Kit f
  ATP檸檬酸裂解酶測試盒100管/96樣的詳細(xì)資料:

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測。

特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

產(chǎn)品名稱

ATP檸檬酸裂解酶測試盒100管/96樣

規(guī)格

100管/96樣

檢測方法

微量法

貨號

BJ-01S9852

11.png 

 

 

商品介紹:

測定意義:

ACL(EC4.1.3.8)是脂肪酸合成中的關(guān)鍵酶,其催化產(chǎn)生的乙??捎糜谥舅岷铣珊吞兼溠娱L、黃酮類物質(zhì)合成、氨基酸合成等。

測定原理:

ACL在ATP和存在的情況下催化檸檬酸裂解為乙酰、草酰乙酸、腺苷二磷酸和磷酸鹽。蘋果酸脫氫酶進(jìn)一步催化草酰乙酸和NADH生成蘋果酸和NAD+,在340nm測定NADH減少速率,計(jì)算ACL活性。

需自備的儀器和用品:

紫外分光光度計(jì)、臺式離心機(jī)、水浴鍋、移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水

測定步驟:

1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。

2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。

3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)

4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。

5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)

選擇抗凝的注意點(diǎn):

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。

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組織谷氨酰胺(glutaminase)活性比色法定量檢測試劑盒  20

BPE蛋白標(biāo)記試劑盒(不含BPE)  3次(1毫克/次)

全組織NADH心肌黃活性染色試劑盒  10

細(xì)營養(yǎng)瓊脂平板  50個(gè)

全組織免疫組織化學(xué)AP聯(lián)NBT/BCIP基礎(chǔ)檢測試劑盒(無一抗和二抗)  50

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石蠟切片細(xì)胞細(xì)胞有絲分裂熒光顯微鏡檢測試劑盒  10/20

PDGF-A蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒  5

 


產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: ATP檸檬酸裂解酶 測試盒 100管/96樣
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