本公司代理ATCC細(xì)胞,提供售前售后一條龍服務(wù),若要獲取詳細(xì)的說(shuō)明書或價(jià)格信息,請(qǐng)咨詢?cè)诰€客服。 產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 | HBE(人支氣管上皮樣細(xì)胞)說(shuō)明書 | HBE (human bronchial epithelial cells) | 5×106cells |
產(chǎn)品特點(diǎn): 1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。 2、 可以處理各種細(xì)菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。 3、 將蛋白提取的時(shí)間縮短至30分鐘-1小時(shí)。 4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。 5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。 6、 紫外檢測(cè)蛋白濃度時(shí),背景干擾低。 7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。 8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。 ? 細(xì)胞培養(yǎng)技巧: 一、凍存時(shí)的注意事項(xiàng): 1. 在冷凍保存之前,應(yīng)觀察細(xì)胞生長(zhǎng)是否良好(log phase) 且存活率高,凍存的細(xì)胞密度為80 – 90 % 2. 冷凍前檢測(cè)細(xì)胞是否保有其*性質(zhì),例如是否有雜細(xì)胞或者支原體等。 3. 使用的DMSO 應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí),以5~10 ml 小體積分裝,4 度避光保存,勿作多次解凍。使用的甘油也應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí),以高壓蒸汽 滅菌后避光保存。在開(kāi)啟后一年內(nèi)使用,因長(zhǎng)期儲(chǔ)存后對(duì)細(xì)胞會(huì)有毒性。 4. 冷凍保存的細(xì)胞濃度: 4-1. 正常的成纖維細(xì)胞: 1-3x 10^6 cells/ml 4-2 雜交瘤細(xì)胞: 1~3 x 10^6 cells/ml,細(xì)胞濃度不要太高,某些雜交瘤會(huì)因冷凍濃度太高而在解凍24 小時(shí)后。 4-3.貼壁腫瘤細(xì)胞: 1 x 10^6,依細(xì)胞種類而異。腺癌類的細(xì)胞解凍后須較高之濃度,而HeLa 只需1-3 x 10^6 cells/ml。 4-4. 懸浮細(xì)胞: 5~10 x 10^6 cells/ml, 而淋巴類細(xì)胞須至少5 x 10^6 cells/ml。 5. 冷凍保護(hù)劑濃度為5 %或10 % DMSO,若是不確定細(xì)胞之冷凍條件,在做冷凍保存之同時(shí),亦應(yīng)作一個(gè)backup culture,以防止冷凍失敗。 凍存的步驟: 1. 冷凍前一日前更換半量或全量培養(yǎng)基,觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情形。 2. 使用ScienCell凍存液 混合均勻,置于室溫下待用。 3. 依細(xì)胞傳代培養(yǎng)的操作,收集培養(yǎng)好的細(xì)胞,取少量細(xì)胞懸浮液(約0.1 ml) 計(jì)數(shù)細(xì)胞濃度及凍前存活率。 4. 離心,去除上清液,加入適量冷凍保存溶液,使細(xì)胞濃度為1-5 x 10^6 cells/ml,混合均勻, 分裝于已標(biāo)示*之冷凍保存管中,1 ml/vial,并取少量細(xì)胞懸浮液作污染檢測(cè)。 5. 冷凍保存方法1: 冷凍管置于4 度10 分鐘→ -20 度 30 分鐘→ -80 度16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vapor phase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。 6. 冷凍保存方法2: 冷凍管置于已設(shè)定程序之等速降溫機(jī)中,再放入液氮槽中。程序?yàn)? program 7: HB CELL 。 培養(yǎng)操作步驟 : 1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布; 2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片); 3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí); 4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中; 5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。 實(shí)驗(yàn)報(bào)告: 一、分離與培養(yǎng): 1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span> 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min; 2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜; 5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 全氟辛(分析標(biāo)準(zhǔn)品, 用于環(huán)境分析) 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品, 用于環(huán)境分析 Pentadecafluorooctanoic acid 支原體肉湯培養(yǎng)基基礎(chǔ)/Mycoplasma Broth Base禽胚組織制備的疫苗支原體檢測(cè)40克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口 烏藥 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg G蛋白偶聯(lián)受體GPR62蛋白抗體 TMEM27 ELISA Kit 跨膜蛋白27(TMEM27)ELISA試劑盒 基蓮心堿 英文名稱:Neferine 保存:-20℃ 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支 環(huán)指蛋白125抗體 5,7-二羥基色原 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: 10mg 化雄激素受體抗體 TPH ELISA Kit 色氨羥化酶(TPH)ELISA試劑盒 精喹禾靈(分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%) 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,98% Quizalofop-p-ethyl 卵黃瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)/EYA培養(yǎng)基基礎(chǔ)/Egg Yolk Agar Medium Base肉毒梭菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌的分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口 素 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: HPLC≥99%,20mg/支 Bcl-2同源拮抗劑抗體 PL-A2 ELISA Kit 脂酶A2(PL-A2)ELISA試劑盒 氧化銅粉(>99%,BR) 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR Copper(II) oxide 狀腺球蛋白(TG)重組蛋白英文名稱:Recombinant Thyroglobulin (TG) 血根堿 英文名稱:Sanguinarine 保存:-20℃ 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支 TEC酪氨激酶蛋白抗體 縮二脲 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Biuret 血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(PROCR)重組蛋白英文名稱:Recombinant Protein C Receptor, Endothelial (PROCR) 泊苷前體 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: 50mg 人神經(jīng)源性位點(diǎn)缺口同系物蛋白2(NOTCH2)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA試劑盒,英文名:sLR ELISA Kit 己定 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: 100mg 異質(zhì)核糖核蛋白U抗體 CALR3 ELISA Kit 鈣網(wǎng)蛋白3(CALR3)ELISA試劑盒 二丹參Ⅰ 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: 20mg 人細(xì)絲蛋白B (Filamin-B) ELISA試劑盒人96T31.2-2000 pg/mL小鼠性酶1(ACP1)ELISA試劑盒,英文名:ACP1 ELISA Kit 盧比前列腺素/盧比前列 質(zhì)量規(guī)格:>99% Lubiprostone 馬鈴薯瓊脂 規(guī)格: 100g 用途: 用于霉菌的培養(yǎng) HBE(人支氣管上皮樣細(xì)胞)說(shuō)明書ARRDC1 抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml Laminin 5 層粘連蛋白5(laminin γ2)抗體 規(guī)格: 0.2ml Rabbit anti-mouse Kappa light chain/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈 規(guī)格: 0.1ml ATP5J ATP5J抗體 規(guī)格: 0.1ml FOXA1/HNF3-alpha 轉(zhuǎn)錄因子HNF-3α抗體 規(guī)格: 0.1ml Prohibitin 抑制素/瘤抑制因子抗體 規(guī)格: 0.1ml Jab1 Jun激活區(qū)域-連接蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml Cyclophilin F 親環(huán)蛋白(親環(huán)素)PPIF抗體 規(guī)格: 0.2ml ADCK3/CABC1 伴侶蛋白bc1同源復(fù)合體抗體 規(guī)格: 0.2ml phospho-IKK beta(Ser471) 磷酸化KB抑制蛋白激酶β抗體 規(guī)格: 0.1ml MRP3 多藥耐藥相關(guān)蛋白3抗體 規(guī)格: 0.1ml ENC1/KLHL35 外胚層神經(jīng)皮層蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml VMAT1/VAT1 嗜鉻顆粒胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白VAT1抗體 規(guī)格: 0.1ml KiSS1R/GPR54 G蛋白偶聯(lián)受體54抗體 規(guī)格: 0.1ml |