特別提醒：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測(cè)。 | 產(chǎn)品名稱 | 輔酶ⅠNAD測(cè)試盒100管/48樣 | | 規(guī)格 | 100管/48樣 | | 檢測(cè)方法 | 微量法 | | 貨號(hào) | BJ-01S9510 |
商品介紹：
| 測(cè)定意義 輔酶ⅠNAD(H)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，NAD+是糖酵解（EMP）和三羧酸循環(huán)（TCA）的主要?dú)涫荏w，生成的NADH經(jīng)呼吸電子鏈（ETC）傳遞把電子交給氧，在合成ATP的同時(shí)，形成大量的ROS，同時(shí)NADH再生為NAD+。糖、脂、蛋白質(zhì)三大代謝物質(zhì)分解中的氧化反應(yīng)絕大部分通過這一體系完成。NAD(H)含量和NADH/NAD+比值的高低可用于評(píng)價(jià)糖酵解和TCA循環(huán)的強(qiáng)弱。較高的NAD(H)及NADH/NAD+比值說明細(xì)胞呼吸耗氧量較高，處于過氧化狀態(tài)。此外，NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和TCA循環(huán)。另外，NAD+降解產(chǎn)物對(duì)細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)、代謝和基因表達(dá)等具有重要的調(diào)控作用。 測(cè)定原理 分別用酸性和堿性提取液提取樣品中NAD+和NADH，NADH通過PMS的遞氫作用，還原氧化型噻唑藍(lán)（MTT）為甲瓚，在570nm下檢測(cè)吸光值；而NAD+可被乙醇脫氫酶還原為NADH，進(jìn)一步采用MTT還原法檢測(cè)。 需自備的儀器和用品 可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
測(cè)定步驟： 1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。 2、 試劑三的稀釋：將試劑三用蒸餾水稀釋50倍，用多少配多少。（試劑三和蒸餾水1：49稀釋。 3、 工作液配制：在試劑一加入100μl試劑二，充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。（若一次性測(cè)定樣本較少，可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml：0.1ml的比例混勻配制） 4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解（溶解后一周內(nèi)用完）。 5、 樣本測(cè)定（在96孔板中依次加入下列試劑） 選擇抗凝的注意點(diǎn)： ①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致; ②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固; ③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）; ④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。 操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。 2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。 3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。 4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。 5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。 6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。 7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。 Anti-Angiotensin II receptor 血管緊張素Ⅱ受體抗體 0.2ml Anti-ANGPTL1/ANG-1 血管位蛋白樣1/血管生成素樣蛋白-1抗體 0.2ml Anti-ANGPTL2/ANG-2 血管位蛋白樣2/血管生成素樣蛋白-2抗體 0.1ml Anti-ANGPTL4/ANG-4 血管位蛋白樣4/血管生成素樣蛋白-4抗體 0.2ml Anti-Annexin A 膜粘連蛋白-A抗體 0.2ml Anti-Annexin II 膜粘連蛋白-2抗體 0.2ml Anti-Annexin V 膜粘連蛋白-5抗體 0.1ml Anti-Annexin V 重組膜粘連蛋白-5抗體 0.1ml Anti-AP1 銜接蛋白1抗體 0.2ml Anti-Apaf-1 凋亡蛋白活性因子-1抗體 0.1ml Anti-APC APC活化蛋白C抗體 0.2ml anti-apoD 載脂蛋白D抗體 0.2ml Anti-Apo-E 載脂蛋白E抗體 0.1ml Anti-APP695/770 淀粉樣肽前體蛋白抗體 0.1ml Anti-AQP-2 水通道蛋白-2抗體 0.1ml Anti-AQP-3 水通道蛋白-3抗體 0.1ml Anti-AQP4 水通道蛋白-4抗體 0.1ml Anti-AR 雄激素受體抗體 0.1ml Anti-ARC ARC抗體 0.2ml Anti-ARF6 ADP核糖基化因子6抗體 0.2ml Anti-Aromatase P450 芳香化酶/細(xì)胞色素P450/P450抗體 0.1ml anti-ARIP2a 激活素受體2A/激活素受體相互作用蛋白2a抗體 0.1ml anti-β-arrestin 1/2 β-抑制蛋白1/2抗體 0.1ml anti-ARIP2B 激活素受體2B/激活素受體相互作用蛋白2b抗體 0.2ml Anti-ART 膠質(zhì)細(xì)胞系源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子GDNF的一種抗體 0.1ml Anti-ARα1 α1腎上腺素能受體抗體 0.1ml Anti-ASCL1/MASH1 神經(jīng)母細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)移因子抗體 0.1ml anti-ASPP1 p53凋亡刺激蛋白1抗體 0.1ml anti-ASPP2 P53凋亡刺激蛋白2 0.1ml Anti-AT/AGT 血管緊張素原抗體 0.1ml 生長(zhǎng)激素2(GH2)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Hormone 2 (GH2) 96T Mus musculus (Mouse) 生長(zhǎng)激素2(GH2)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Hormone 2 (GH2) 96T Rattus norvegicus (Rat) 白介素1η(IL1η)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 1 Eta (IL1h) 96T Homo sapiens (Human) 白介素1η(IL1η)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 1 Eta (IL1h) 96T Mus musculus (Mouse) 白介素1η(IL1η)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 1 Eta (IL1h) 96T Rattus norvegicus (Rat) 干擾素ε(IFNε)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interferon Epsilon (IFNe) 96T Homo sapiens (Human) 干擾素ε(IFNε)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interferon Epsilon (IFNe) 96T Mus musculus (Mouse) 干擾素κ(IFNκ)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interferon Kappa (IFNk) 96T Homo sapiens (Human) 干擾素κ(IFNκ)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interferon Kappa (IFNk) 96T Mus musculus (Mouse) 干擾素κ(IFNκ)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interferon Kappa (IFNk) 96T Rattus norvegicus (Rat) EB病毒誘導(dǎo)蛋白3(EBI3)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Epstein Barr Virus Induced Protein 3 (EBI3) 96T Homo sapiens (Human) EB病毒誘導(dǎo)蛋白3(EBI3)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Epstein Barr Virus Induced Protein 3 (EBI3) 96T Mus musculus (Mouse) EB病毒誘導(dǎo)蛋白3(EBI3)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Epstein Barr Virus Induced Protein 3 (EBI3) 96T Rattus norvegicus (Rat) 白介素17C(IL17C)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 17C (IL17C) 96T Homo sapiens (Human) 白介素17C(IL17C)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 17C (IL17C) 96T Mus musculus (Mouse) 白介素17C(IL17C)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 17C (IL17C) 96T Rattus norvegicus (Rat) N-乙酰β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for N-Acetyl Beta-D-Glucosaminidase (NAGase) 96T Homo sapiens (Human) N-乙酰β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for N-Acetyl Beta-D-Glucosaminidase (NAGase) 96T Mus musculus (Mouse) N-乙酰β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for N-Acetyl Beta-D-Glucosaminidase (NAGase) 96T Rattus norvegicus (Rat) 基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Matrix Metalloproteinase 1 (MMP1) 96T Bos taurus; 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