利用標(biāo)記物進(jìn)行蛋白快速純化已成為一個(gè)通用的方法,現(xiàn)已有許多不同的標(biāo)記物系統(tǒng)可資利用。它們?nèi)坷昧藰?biāo)記物和固相配體間的相互作用,從而可從復(fù)雜的提取物中對(duì)標(biāo)記蛋白進(jìn)行選擇性的結(jié)合和洗脫。已設(shè)計(jì)成功含有這些標(biāo)記物的多種載體,在融合蛋白中,標(biāo)記物片段和靶蛋白之間具有高度特異的蛋白酶所能識(shí)別的酶切部位,使得必要時(shí)可將標(biāo)記物從蛋白上分離(Nygrenetal.1994)。
3種zui為常用的用于蛋白純化的標(biāo)記物是GST、His和表位標(biāo)記物。
如上所述,表位標(biāo)記物廣泛地應(yīng)用于蛋白的純化和檢測(cè)。為了使標(biāo)記物在純化中發(fā)揮良好的作用,重要的是毋需使用劇烈的條件即能使抗體和標(biāo)記物之間的相互作用發(fā)生解離,劇烈的條件可使抗原發(fā)生不可逆變性或回收率低。用游離多肽競(jìng)爭(zhēng)洗脫法從結(jié)合于固相的抗體上洗脫標(biāo)記蛋白,是一個(gè)頗具吸引力的措施。在前面所列出的表位標(biāo)記物中,HA標(biāo)記物、E標(biāo)記物、微管蛋白標(biāo)記物(Skinner et a1.1991;Stammers eta1.1991)、KT3標(biāo)記物(Kwatraetal.1995)以及FLAG標(biāo)記物等已成功地用多肽洗脫方法進(jìn)行了蛋白純化。
Anti-Bad (BCL-xL/BCL-2-associated death promoter) 相關(guān)死亡促進(jìn)因子Bad抗體
Anti-Bad (BCL-xL/BCL-2-associated death promoter) 相關(guān)死亡促進(jìn)因子Bad抗體
Anti-phospho-BAD(pSer128) 磷酸化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體
Anti-Bak(BCL2 homologous antagonist/killer) Bcl-2同源拮抗劑Bak抗體
Anti-BADH2 (Betaine-aldehyde dehydrogenase ) BADH2抗體
Anti-Bassoon/BSN(zinc finger protein 231) 鋅指蛋白231抗體
Anti-Batroxobin 蛇毒巴曲酶抗體
Anti-Bax (Bcl-2 Assaciated X protein) Bax(小鼠來(lái)源抗體)
Anti-Bax(Bcl-2 Assaciated X protein) Bax抗體
Anti-Bcl-2(B cell lymphoma/leukemia-2) Bcl-2抗體
Anti-Bcl-xL Bcl-xL蛋白抗體
Anti-BBC3/PUMA(bcl-2 binding component 3) p53正向細(xì)胞凋亡調(diào)控因子抗體
Anti-phospho-Bcl-xL(pSer62) 抗磷酸化Bcl-xL(pSer62)蛋白抗體
Anti-BCHE(butyrylcholinesterase)NT 丁酰膽堿脂酶抗體(N端)
Anti-BCHE(mouse Anti-butyrylcholinesterase Monoclonal) 抗丁酰膽堿脂酶單克隆抗體
Anti-BCHE(butyrylcholinesterase)CT 丁酰膽堿脂酶抗體(C端)