成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF)的檢測(cè)
成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(fibroblast growthfactor,F(xiàn)GF)可促進(jìn)多種細(xì)胞分裂和血管生成、誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞趨化及調(diào)節(jié)細(xì)胞代謝,其作用沒(méi)有種屬特異性??蛇x用3T3細(xì)胞、腎上腺皮質(zhì)血管內(nèi)皮細(xì)胞、人臍帶靜脈內(nèi)皮細(xì)胞、BHK-21細(xì)胞及牛動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞(AEC)等作為檢測(cè)FGF促細(xì)胞增殖作用的靶細(xì)胞。
1.于12孔細(xì)胞培養(yǎng)板每孔中加入1×104/0.5mLAEC或3T3細(xì)胞。
2.用含0.2%明膠的PBS系列稀釋待測(cè)樣品,每孔加0.5mL稀釋樣品,以后隔天更換同樣濃度的稀釋樣品,對(duì)照孔加0.5mL細(xì)胞培養(yǎng)液,置37~C,5%C02條件下培養(yǎng)4d。
3.采用MTF法、3H-TdR摻人法或直接計(jì)數(shù)法檢測(cè)生長(zhǎng)的細(xì)胞,繪制劑量反應(yīng)曲線,取能誘導(dǎo)50%zui大增殖反應(yīng)的zui高樣品稀釋度為IUFGF。
ES-2(卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞) ATCC 株
Saos-2(成骨肉瘤細(xì)胞) ATCC 株
MDA-MB-468(乳腺癌細(xì)胞) ATCC 株
SK-MES-1(肺鱗癌細(xì)胞) ATCC 株
MDA-MB-435S(乳腺癌細(xì)胞) ATCC 株
NCI-H661(大細(xì)胞肺癌細(xì)胞) ATCC 株
ZR-75-1(乳腺癌細(xì)胞) ATCC 株
NCI-H292(肺癌細(xì)胞(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移)) ATCC 株
Hs 578T(乳腺癌細(xì)胞) ATCC 株
U-937(組織細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞) ATCC 株
CFPAC-1(胰腺癌細(xì)胞) ATCC 株
A3(淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞) ATCC 株
PANC-1(胰腺癌細(xì)胞) ATCC 株