免疫凝集技術(shù)
凝集反應(yīng)的發(fā)生分兩個階段:
①抗原抗體的特異結(jié)合;
②出現(xiàn)可見的顆粒凝集??乖c抗體相遇,很快就發(fā)生特異性結(jié)合,至于是否會出現(xiàn)可見反應(yīng),則受一定條件的影響。
通常,細(xì)菌和紅細(xì)胞等顆??乖趹乙褐袔踟?fù)電荷,周圍吸引一層與之牢固結(jié)合的正離子,外面又排列一層松散的負(fù)離子層,構(gòu)成一個雙層離子云,穩(wěn)定的雙電層使得顆粒間相互排斥。當(dāng)特異性抗體與相應(yīng)抗原顆?;パa(bǔ)結(jié)合后,抗體起橋聯(lián)作用,克服排斥力,使得各顆粒聚集在一起。但當(dāng)抗體分子太少,不能克服各顆粒間排斥力時,則不能使顆粒聚集。因此,在凝集反應(yīng)中,IgM類抗體的作用比IgG類抗體要大數(shù)百倍,所以IgG類抗體常出現(xiàn)不*反應(yīng),即不可見的抗原抗體反應(yīng)。這種抗體有時又稱不*抗體。
根據(jù)抗原的性質(zhì)與反應(yīng)的方式不同,免疫凝集反應(yīng)技術(shù)大體上可分為4類:
①直接凝集反應(yīng)技術(shù);
②間接凝集反應(yīng)技術(shù);
③協(xié)同凝集反應(yīng)技術(shù);
④抗球蛋白試驗(yàn)。
免疫凝集反應(yīng)技術(shù)常用的試驗(yàn)方法有3種:
①玻片法,主要做定性試驗(yàn),如菌種的鑒定及分型;
②試管法,作為一種定量試驗(yàn),多用于測定血清中特異抗體的效價;
③微量血凝反應(yīng)板法,也是一種定量試驗(yàn),由于此法成本低,因而應(yīng)用較廣。