1．?dāng)喽股匦Ч臐舛龋?不一樣的細(xì)胞株對(duì)各種抗生素有不一樣的敏感性，因而在選擇前要做預(yù)實(shí)驗(yàn)，斷定抗生素對(duì)所選擇細(xì)胞的zui低效果濃度。ELISA試劑盒
① 提早 24 小時(shí)在 96 孔板或 24 孔板中接種細(xì)胞 8 孔，接種量以第二天長成 25%單層為宜，置 CO2 孵箱中 37℃培育過夜。
② 將培育液換成含抗生素的培育基， 抗生素濃度按梯度遞加0,（50, 100, 200, 400, 600, 800 和1000μ g/ml）。
③ 培育 10-14 天以絕大部分細(xì)胞濃度為準(zhǔn),通常為 400-800μg/ml，選擇穩(wěn) 定表達(dá)克隆時(shí)可比該濃度恰當(dāng)提高一個(gè)等級(jí)維持時(shí)運(yùn)用選擇濃度的一半。
2．轉(zhuǎn)染按前面的過程進(jìn)行。
3．轉(zhuǎn)染 72 小時(shí)后按 1: 10 的比例將轉(zhuǎn)染細(xì)胞在 6 孔板中傳代，換為含預(yù)實(shí)驗(yàn)中 斷定的抗生素濃度的選擇培育基。在6 孔板內(nèi)可見單個(gè)細(xì)胞，持續(xù)培育可見單個(gè) 細(xì)胞分裂繁衍構(gòu)成單個(gè)抗性集落，此刻可用兩種辦法選擇單克隆。
① 濾紙片法：用消毒的 5x5mm 濾紙片浸過胰酶，將濾紙片貼在單細(xì)胞集落上 10-15 秒，取出粘附有細(xì)胞的濾紙片放于 24 孔板中持續(xù)加壓培育。 細(xì)胞在 24 孔板中長滿后轉(zhuǎn)入 25cm2 培育瓶中，長滿后再轉(zhuǎn)入 75cm2 培育瓶中培育。
② 有限稀釋法：將細(xì)胞消化下來后做接連的 10 倍稀釋（10-2-10-10） ，將每 一稀釋度的細(xì)胞滴加到 96 孔板中培育，7- 10 天后，選擇單個(gè)克隆成長的孔再一次進(jìn)行克隆。
4. ELISA或 Westernblot檢查單克隆細(xì)胞中外源蛋白的表達(dá)狀況因?yàn)椴灰粯涌寺〉?表達(dá)水平存在區(qū)別因而可一起選擇多個(gè)克隆選擇表達(dá)量zui高的克隆傳代并保種。

CACNB4    L型電壓依賴型鈣通道β4抗體
CACNA1G + CACNA1H    電壓依賴性鈣通道CACNA1G+CACNA1H抗體
CABP1    鈣結(jié)合蛋白1抗體
CAPON    神經(jīng)型一氧化氮合成酶結(jié)合蛋白抗體
CHRM4    毒蕈堿型乙酰膽堿受體M4抗體
CaMK2 alpha    鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2α抗體
CACYBP    周期蛋白結(jié)合蛋白抗體
CDCA2    細(xì)胞分裂周期蛋白2抗體
CDC45L    細(xì)胞分裂周期調(diào)控蛋白45抗體
CAPH    染色體相關(guān)蛋白H抗體
CEP76    中心體蛋白質(zhì)76抗體

ELISA試劑盒