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各種細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法比較
點(diǎn)擊次數(shù):467 更新時(shí)間:2016-07-13

    ELISA試劑盒細(xì)胞建議用CSCL梯度離心,轉(zhuǎn)染是拷貝數(shù)較多 GIBCO BRL ,Promega 陽(yáng)離子脂質(zhì)體法 帶正電的脂質(zhì)體與核酸帶負(fù)電的磷酸基團(tuán)形成復(fù)合物,然后脂質(zhì)體上剩余的電核與細(xì)胞膜上的唾液酸殘基的負(fù)電核結(jié)合;另一種解釋是通過細(xì)胞是內(nèi)吞作用而被進(jìn)入細(xì)胞。(若DNA濃度過高,中和脂質(zhì)體表面電核,而降低了與細(xì)胞的結(jié)合能力) 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染,瞬時(shí)轉(zhuǎn)染,所有細(xì)胞 使用方法簡(jiǎn)單,可攜帶大片段DNA,通用于各種類型的裸露DNA或RNA,能轉(zhuǎn)染各種類型的細(xì)胞,沒有免疫原性。

    雖在體外基因轉(zhuǎn)染中有很高的效率,但在體內(nèi),能被血清清除,并在肺組織內(nèi)累積,誘發(fā)強(qiáng)烈的抗炎反應(yīng),導(dǎo)致高水平的毒性,這在很大程度上限制了其應(yīng)用 陽(yáng)離子聚合物 帶正電的聚合物與核酸帶負(fù)電的磷酸基團(tuán)形成帶正電的復(fù)合物后與細(xì)胞表面帶負(fù)電的蛋白多糖相互作用,并通過內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞。 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染,瞬時(shí)轉(zhuǎn)染,所有細(xì)胞 除了具有陽(yáng)離子脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染效率高,操作簡(jiǎn)單,適用范圍廣,重復(fù)性好等特點(diǎn)外,還具有在體內(nèi),轉(zhuǎn)染效率高,細(xì)胞毒性低等特點(diǎn),是新一代的轉(zhuǎn)染試劑。
    病毒介導(dǎo)法 逆轉(zhuǎn)錄病毒(RNA) 通過病毒中膜糖蛋白和宿主細(xì)胞表面的受體相互作用而進(jìn)入宿主細(xì)胞,之后反轉(zhuǎn)入酶啟動(dòng)合成DNA并隨機(jī)整合到宿主基因組中 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染,特定宿主細(xì)胞 可用于難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞、原代細(xì)胞,體內(nèi)細(xì)胞等,但攜帶基因不能太大(<8kb),細(xì)胞需處分裂期,需考慮安全因素  腺病毒(雙鏈DNA) 先和細(xì)胞表面的受體結(jié)合,繼而在αv整合素介導(dǎo)下被細(xì)胞內(nèi)吞 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染,特定宿主細(xì)胞 可用于難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞,需考慮安全因素 中國(guó)科學(xué)院典型培養(yǎng)物保藏委員會(huì) Biolistic 顆粒傳遞法 (基因槍粒子轟擊法) 將DNA用顯微重金屬顆粒沉淀,再將包被好的顆粒用彈道裝置投射入細(xì)胞,

    DNA在胞內(nèi)逐步釋放,表達(dá) 瞬時(shí)性轉(zhuǎn)染,穩(wěn)定轉(zhuǎn)染 可用于:人的表皮細(xì)胞,纖維原細(xì)胞,淋巴細(xì)胞系以及原代細(xì)胞 . 顯微注射法 用顯微操作將DNA直接注入靶細(xì)胞核 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染,瞬時(shí)轉(zhuǎn)染 轉(zhuǎn)染細(xì)胞數(shù)有限,多用于工程改造或轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的胚胎細(xì)胞 . 電穿孔法 高脈沖電壓破壞細(xì)胞膜電位,DNA通過膜上形成的小孔導(dǎo)入 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染,瞬時(shí)轉(zhuǎn)染,所有細(xì)胞 適用性廣,除了質(zhì)粒外,還可轉(zhuǎn)染大的基因組。

FMNL1    成蛋白相關(guān)蛋白1抗體                
FAM89B    腫瘤病毒受體同源蛋白抗體                
FGF11    成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子11抗體                           
Frizzled 2    Wnt信號(hào)受體FZD2蛋白抗體                
FMDV Polyprotein (3D polymerase)    口蹄疫病毒                
FBX09    F-box蛋白9抗體                
FAR1    脂肪?;o酶A還原酶1抗體                
FAM129A    細(xì)胞生長(zhǎng)抑制基因39蛋白抗體                
ELISA試劑盒              

 

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