ELISA試劑盒的影響因素
點(diǎn)擊次數(shù):692 更新時(shí)間:2016-06-13
ELISA試劑盒,即酶聯(lián)免疫法。ELISA法具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好的特點(diǎn),并具有操作簡(jiǎn)便、無放射性危害的優(yōu)點(diǎn),因而多年來廣泛應(yīng)用于各高校、醫(yī)院、血站和科研機(jī)構(gòu)的實(shí)驗(yàn)室中。
影響ELISA實(shí)驗(yàn)的因素
我們技術(shù)人員通過幾年的實(shí)驗(yàn)觀察,認(rèn)為影響ELISA實(shí)驗(yàn)的因素有如下三方面:
一、試劑盒
1、抗原、抗體活性對(duì)效價(jià)的影響:主要是試劑中抗體(或抗原)的效價(jià)降低或失活,結(jié)果不易判斷。再有ELISA試劑盒靈敏度高,對(duì)雜質(zhì)的反應(yīng)靈敏度也高,實(shí)驗(yàn)中空白對(duì)照OD值偏高或假陽性;
2、酶結(jié)合物濃度過高,也會(huì)導(dǎo)致OD值假性增高。
二、試驗(yàn)儀器
1、加樣器是否經(jīng)過校正,酶免測(cè)定血清用血量很少,如手工加樣器的性能不好,吸取樣品不,會(huì)使結(jié)果忽高忽低;
2、每次洗板前,應(yīng)檢查洗板機(jī)針孔有無堵塞。
三、操作
1、檢測(cè)前先將試劑盒從冰箱取出置室溫平衡20min后使用,試劑用完及時(shí)放回冰箱冷藏,以免造成試驗(yàn)結(jié)果假性降低;
2、加樣時(shí)注意勿觸及包被板底部,以免擦傷包被物使抗體(抗原)脫落而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性;
3、洗滌不充分,會(huì)使結(jié)果假性增高,過分洗滌呈假陰性;
4、比色時(shí)應(yīng)保持包被孔底部無異物、無水汽,特別是冬季板從37℃水浴箱取出時(shí),底部留有水汽,應(yīng)將板底擦干后進(jìn)行比色,水汽或孔內(nèi)氣泡也會(huì)使OD值升高;
5、抗原與抗體反應(yīng)達(dá)到*平衡,依賴于溫度與時(shí)間。溫度高于45℃易引起失活及標(biāo)記物脫落,溫度低于4℃,影響反應(yīng)速度。
總之,由于ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的影響因素較多,在實(shí)際工作中必須操作規(guī)范、仔細(xì),避免和排除各種因素的影響,使之得到準(zhǔn)確可靠的檢驗(yàn)結(jié)果。
phospho-ETS1(Thr38)磷酸化Ets轉(zhuǎn)錄因子家族e(cuò)ts1抗體
phospho-ECT2(Ser370)磷酸化上皮細(xì)胞癌轉(zhuǎn)化蛋白2抗體
EPX嗜酸性粒細(xì)胞過氧化物酶抗體
EndoG核酸內(nèi)切酶G抗體
EPHA10酪氨酸蛋白激酶受體A10抗體
EXOC2胞吐囊復(fù)合體蛋白2抗體
phospho-eIF4EBP1(Thr37+Thr46)磷酸化4E結(jié)合蛋白1抗體
phospho-ERK1/2(Thr202+Tyr204)磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1/2抗體
E2EPF泛素交聯(lián)酶抗體
EBNA3BEB病毒核抗原-3B抗體
phospho-Eg5(Thr926)磷酸化驅(qū)動(dòng)蛋白樣蛋白1抗體
EID1乙酰基轉(zhuǎn)移酶EID1抗體
EB3微管相關(guān)蛋白EB家族3抗體
EIF5真核翻譯起始因子5抗體
ELAC2遺傳性前列腺癌蛋白2抗體
phospho-MEK1(Ser385)磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1抗體
ELISA試劑盒
影響ELISA實(shí)驗(yàn)的因素
我們技術(shù)人員通過幾年的實(shí)驗(yàn)觀察,認(rèn)為影響ELISA實(shí)驗(yàn)的因素有如下三方面:
一、試劑盒
1、抗原、抗體活性對(duì)效價(jià)的影響:主要是試劑中抗體(或抗原)的效價(jià)降低或失活,結(jié)果不易判斷。再有ELISA試劑盒靈敏度高,對(duì)雜質(zhì)的反應(yīng)靈敏度也高,實(shí)驗(yàn)中空白對(duì)照OD值偏高或假陽性;
2、酶結(jié)合物濃度過高,也會(huì)導(dǎo)致OD值假性增高。
二、試驗(yàn)儀器
1、加樣器是否經(jīng)過校正,酶免測(cè)定血清用血量很少,如手工加樣器的性能不好,吸取樣品不,會(huì)使結(jié)果忽高忽低;
2、每次洗板前,應(yīng)檢查洗板機(jī)針孔有無堵塞。
三、操作
1、檢測(cè)前先將試劑盒從冰箱取出置室溫平衡20min后使用,試劑用完及時(shí)放回冰箱冷藏,以免造成試驗(yàn)結(jié)果假性降低;
2、加樣時(shí)注意勿觸及包被板底部,以免擦傷包被物使抗體(抗原)脫落而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性;
3、洗滌不充分,會(huì)使結(jié)果假性增高,過分洗滌呈假陰性;
4、比色時(shí)應(yīng)保持包被孔底部無異物、無水汽,特別是冬季板從37℃水浴箱取出時(shí),底部留有水汽,應(yīng)將板底擦干后進(jìn)行比色,水汽或孔內(nèi)氣泡也會(huì)使OD值升高;
5、抗原與抗體反應(yīng)達(dá)到*平衡,依賴于溫度與時(shí)間。溫度高于45℃易引起失活及標(biāo)記物脫落,溫度低于4℃,影響反應(yīng)速度。
總之,由于ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的影響因素較多,在實(shí)際工作中必須操作規(guī)范、仔細(xì),避免和排除各種因素的影響,使之得到準(zhǔn)確可靠的檢驗(yàn)結(jié)果。
phospho-ETS1(Thr38)磷酸化Ets轉(zhuǎn)錄因子家族e(cuò)ts1抗體
phospho-ECT2(Ser370)磷酸化上皮細(xì)胞癌轉(zhuǎn)化蛋白2抗體
EPX嗜酸性粒細(xì)胞過氧化物酶抗體
EndoG核酸內(nèi)切酶G抗體
EPHA10酪氨酸蛋白激酶受體A10抗體
EXOC2胞吐囊復(fù)合體蛋白2抗體
phospho-eIF4EBP1(Thr37+Thr46)磷酸化4E結(jié)合蛋白1抗體
phospho-ERK1/2(Thr202+Tyr204)磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1/2抗體
E2EPF泛素交聯(lián)酶抗體
EBNA3BEB病毒核抗原-3B抗體
phospho-Eg5(Thr926)磷酸化驅(qū)動(dòng)蛋白樣蛋白1抗體
EID1乙酰基轉(zhuǎn)移酶EID1抗體
EB3微管相關(guān)蛋白EB家族3抗體
EIF5真核翻譯起始因子5抗體
ELAC2遺傳性前列腺癌蛋白2抗體
phospho-MEK1(Ser385)磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1抗體
ELISA試劑盒