ELISA試劑盒本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中牛免疫球蛋白E（IgE）水平。用純化的抗IgE抗體
包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中加入免疫球蛋白E，再與HRP標(biāo)記的IgE
抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在
HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的
免疫球蛋白E（IgE）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲
線計(jì)算樣品中牛免疫球蛋白E（IgE）的含量。

操作步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上按序設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔 10 孔，在*、第二孔中分別
加標(biāo)準(zhǔn)品 100μl，然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 50μl，混勻；再各取 100μl 分
別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 50μl，混勻后，在第
三孔和第四孔中先各取50μl棄掉；再各取 50μl分別加到第五、第六孔中；再在第五、
第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取 50μl 分別加
到第七、第八孔中；再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 50μl，混勻后從第七、
第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中；再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，
混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（ 稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃 度分別為 240        μg/ml，160μg/ml ，80μg/ml，40μg/ml，20μg/ml）。
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣
品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣
品zui終稀釋度為5 倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，輕輕晃動(dòng)混勻。3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。     
4. 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此
重復(fù) 5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同 3。
8. 洗滌：操作同 5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
15 分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止
液后 15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

CEP76    中心體蛋白質(zhì)76抗體
CEP152    中心體蛋白152抗體
Casein kinase 1 gamma 2    酪蛋白激酶1γ2/casein kinase Iγ1抗體
CLPTM1    唇裂和腭裂相關(guān)跨膜蛋白1抗體
CKLFH8    趨化素樣因子超家族成員8抗體
CKLFH1    趨化素樣因子超家族成員1抗體
CLN6    神經(jīng)細(xì)胞蠟樣質(zhì)脂褐質(zhì)沉積病蛋白CLN6抗體
CEP104    甘氨酸結(jié)合蛋白抗體
Calcyon    多巴胺D1受體相互作用蛋白抗體
Capicua    Capicua蛋白抗體
CA6    碳酸酐酶6抗體
Connexin 29    間隙連接蛋白29抗體
Connexin-29    間隙連接蛋白29抗體
CXCR7    細(xì)胞表面趨化因子受體7抗體
C1orf76    神經(jīng)母細(xì)胞瘤源性分泌蛋白抗體
CHMP2B    染色質(zhì)修飾蛋白2B抗ELISA試劑盒